鼠內(nèi)毒素(endotoxin)酶聯(lián)免疫試劑盒樣本處理及要求: 1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。 2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。 3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。 4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用 PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。 5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)?/span>用。標(biāo)本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。 6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融. 7. 不能檢測(cè)含 NaN3的樣品,因 NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。 鼠內(nèi)毒素(endotoxin)酶聯(lián)免疫試劑盒組成: 試劑盒組成 48 孔配置 96 孔配置 保存 說(shuō)明書 1 份 1 份 封板膜 2 片(48) 2 片(96) 密封袋 1 個(gè) 1 個(gè) 酶標(biāo)包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 標(biāo)準(zhǔn)品:0.9Eu/L 0.5ml×1 瓶 0.5ml×1 瓶 2-8℃保存 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1 瓶 1.5ml×1 瓶 2-8℃保存 酶標(biāo)試劑 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存 樣品稀釋液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存 顯色劑A 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存 顯色劑B液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存 終止液 3ml×1 瓶 6ml×1 瓶 2-8℃保存 20 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 30ml×1 瓶 2-8℃保存 |